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如何正確的進行ELISA測定操作
2017-05-18 臨床ELISA測定現(xiàn)通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測定模式，測定操作非常簡單，一般涉及到標本的收集保存、試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報告及解釋等方面，其中任一步驟的不當都會影響測定結(jié)果，且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚?，F(xiàn)分述如下。一、臨床標本的收集和保存用于ELISA測定的臨床標本zui為常用的是血清（漿），有時因為特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標...
PEI細胞轉(zhuǎn)染液使用方法
2017-05-12 使用方法接種細胞：用膠原酶消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。轉(zhuǎn)染前18-24小時進行細胞的鋪板，以便在轉(zhuǎn)染時，貼壁細胞的密度大約在80%左右。注：培養(yǎng)液中的血清和抗生素不影響轉(zhuǎn)染效率。2.準備EZTrans-DNA復(fù)合物（1）轉(zhuǎn)染前將所有試劑置于室溫10分鐘。下面，以轉(zhuǎn)染24孔板培養(yǎng)皿為例，說明轉(zhuǎn)染的具體方法（如果在別的培養(yǎng)器皿中進行轉(zhuǎn)染，各試劑建議使用量見表1.：（2）將1μg質(zhì)粒DNA稀釋到40μL無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基，用移液槍吹吸3-4次。（3）將3μLEZTran...
ELISA試劑盒實驗有哪些禁忌？
2017-04-25 ELISA檢測系統(tǒng)可謂是免疫學反應(yīng)應(yīng)用到科研出產(chǎn)中zui為敏捷的技術(shù)手段。自己也為此苦惱過很長一段時間，跟著自己技術(shù)水平得進步，或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣，也是熟能生巧吧，現(xiàn)在做方陣，做ELISA已是輕車熟路了，以前檢測一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的，現(xiàn)在給我十個八個的從包被到顯色，一個工作日基本搞定。ELISA試劑盒可是在新老手操縱過程中老是會泛起或大或小的題目，本人在剛開始做ELISA時就面對良多災(zāi)題，固然有師兄師姐鋪路，但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣，好比說花板...
特級胎牛血清說明書
2017-04-19 產(chǎn)品描述李記胎牛血清每一批原材料都經(jīng)嚴格篩選，經(jīng)過3次100nm(0.1μm)過濾，過濾材料符合美國FDA文件要求（21CFR211.72），整個生產(chǎn)過程符合胎牛血清生產(chǎn)、檢測標準（EuropeanUnion(EU)Approved）。內(nèi)毒素含量≤5EU/ml，100%不含病原性病毒（BVDV,IBRV,BPIV3），血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)，批次間質(zhì)量穩(wěn)定，適合于多種細胞培養(yǎng)，也可用于原代細胞、部分干細胞的培養(yǎng)。血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白質(zhì)...
cy染料小動物活體成像操作流程
2017-04-13 吲哚花菁綠(ICG，indocyaninegreen)是經(jīng)過FDA認證的菁染料，出于安全考慮，后期應(yīng)用于活體（人、動物、細胞）的染料在結(jié)構(gòu)上都和ICG有相似或相近之處。cy系列染料是Amersham公司（目前為GE公司）zui初開發(fā)的染料體系，它的橋環(huán)由苯并吲哚變?yōu)檫胚岘h(huán)，并在吲哚的苯環(huán)上對稱地引入硫酸根基團，水溶性得到很大改善，分子量降低后對大分子的親和力有所增加。cy系列菁染料多帶有羥基琥珀酰亞胺活性酯(NHSester)、異硫氰酸酯(NCS)等活性基團，可與蛋白質(zhì)、多肽...
不接觸染料也能進行DNA電泳的分析
2017-02-24 問：您是否為EB有毒，安全染料貴的問題而煩惱？答：試試李記生物的DNA電泳套裝吧!圖1：I、Hela細胞與EB,李記套裝的上樣buffer及李記GelRed在室溫下孵育一小時，用Olympus熒光顯微鏡觀察并拍照，與EB孵育的細胞顯示出綠色熒光，表明染料已透過細胞膜進入細胞并與核酸結(jié)合。李記套裝的上樣buffer及李記GelRed未顯示熒光，說明李記染料未能透過細胞膜進入細胞。II、EB,李記套裝的上樣buffer及李記GelRed染料相同DNA濃度下染色效果。李記生物的DN...
細胞凍存和復(fù)蘇經(jīng)驗總結(jié)
2016-11-29 細胞凍存過程對保持細胞狀態(tài)影響巨大，李記生物結(jié)合多年實踐，總結(jié)出如下實用的細胞凍存流程。“慢凍快融”是細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則，這對zui大限度的保存細胞活力至關(guān)重要。目前細胞凍存多用甘油或二甲基亞砜（DMSO）作為保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性；細胞凍存和復(fù)蘇時，減少細胞內(nèi)冰晶產(chǎn)生是關(guān)鍵。緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少冰晶對細胞的物理損傷。復(fù)蘇細胞采用快速融化的方法可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)融化，避免由于緩慢融化使水分滲...
高分辨率熔解曲線（HRM）分析指南
2016-10-10 HRM(HighResolutionMeltinganalysis，高分辨熔解曲線)同許多熒光PCR技術(shù)一樣，是利用特定dsDNA染料可以插入DNA雙鏈小溝中（PCR產(chǎn)物）的特性，通過實時監(jiān)測升溫過程中dsDNA解鏈，熒光染料脫落，熒光信號減弱或消失的過程，高分辨記錄熔解曲線，從而對樣品進行檢測。HRM技術(shù)利用dsDNA的物理性質(zhì)，準確反映DNA序列堿基配對特異性與解鏈溫度變化的情況，無需使用特異性標記探針，不受突變種類和突變位點的限制，具有高靈敏度和特異性、高通量、操作簡單...

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